1、培養(yǎng)基的制備
培養(yǎng)基是指人們根據(jù)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的各類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),按一定的濃度由人工方法混合配合而成的用于培育微生物生長(zhǎng)的一類營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)而稱之。培養(yǎng)基是微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ),是微生物檢測(cè)工作的重要基礎(chǔ)工作。按使用時(shí)的不同物理狀態(tài),培養(yǎng)基可分為:液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基3種。根據(jù)不同用途(使用目的),培養(yǎng)基又可分為:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)或增殖培養(yǎng)基)、選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基、厭氧培養(yǎng)基5類 。另外按其營(yíng)養(yǎng)成分和濃度是否已知可分為:合成培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)成分和濃度已知)、天然培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)成分和濃度未知)2種。有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)可參考有關(guān)專著和其他有關(guān)微生物學(xué)教科書。
2、培養(yǎng)基的儲(chǔ)存
一般來(lái)說(shuō),未開封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)避光儲(chǔ)存于25℃下陰涼干燥處,開過(guò)封的脫水培養(yǎng)基應(yīng)蓋緊瓶蓋注意密封儲(chǔ)存。已配制好的培養(yǎng)基、緩沖液一般可儲(chǔ)存于生化培養(yǎng)箱2—25℃陰涼干燥處,有條件置冰箱冷藏儲(chǔ)存更好,否則必須在2d內(nèi)使用完畢。USP中有明確規(guī)定:置2—25℃陰涼干燥處如果培養(yǎng)基分裝并儲(chǔ)存于非密閉性容器內(nèi)(如試管、三角燒瓶),則其使用期限為1個(gè)月,但該培養(yǎng)基 的靈敏度試驗(yàn)和其他 的相關(guān)質(zhì)量檢查務(wù)必在距使用時(shí)的前2周內(nèi)完成;如果培養(yǎng)基儲(chǔ)存于密閉性容器(如螺旋蓋瓶)內(nèi),則其使用期限為1年,但該培養(yǎng)基的靈敏度試驗(yàn)和其他的相關(guān)質(zhì)量檢查須在距使用前3個(gè)月內(nèi)完成:如果實(shí)驗(yàn)室購(gòu)買的成品型培養(yǎng)基儲(chǔ)存于密閉容器內(nèi),實(shí)驗(yàn)室可抽取部分代表性樣品進(jìn)行無(wú)菌檢查試驗(yàn)和靈敏度試驗(yàn)。并根據(jù)自己的儲(chǔ)存條件來(lái)制定合理的培養(yǎng)基儲(chǔ)存期,對(duì)培養(yǎng)基的存儲(chǔ)環(huán)境條件進(jìn)行監(jiān)控和記錄,并且要對(duì)相應(yīng)的儲(chǔ)存期和儲(chǔ)存條件進(jìn)行確認(rèn)。
滅菌后的培養(yǎng)基等物品應(yīng)置適當(dāng)條件下保存至規(guī)定的有效期,并對(duì)保存條件進(jìn)行確證。
表 無(wú)菌物品的存儲(chǔ)條件
類型 存放條件 無(wú)菌保效期(年、月、d)
輸液瓶密封裝培養(yǎng)基 2—8℃ 1年
輸液瓶密封裝淋洗液、緩沖液 室溫 2年
螺旋蓋瓶裝培養(yǎng)基 2—8℃ 3個(gè)月
螺旋蓋瓶裝淋洗液、緩沖液 室溫 3個(gè)月
試管裝無(wú)菌培養(yǎng)基(固液) 2—8℃ 14d
試管裝有其他的無(wú)菌試劑 室溫 14d
平皿瓊脂培養(yǎng) 25—35℃電熱恒溫培養(yǎng)箱下培養(yǎng)3d后,存于2—8℃ 14d
取樣用螺旋蓋瓶 室溫 7d
過(guò)濾器等無(wú)菌操作用物品 室溫,潔凈室 內(nèi)或?qū)恿髋_(tái)內(nèi) 7d
表 培養(yǎng)基2—8℃條件保存期限
培養(yǎng)基種類 保存條件 保存時(shí)間
平板培養(yǎng)基 不袋裝 2周
袋裝 6—8周
試管培養(yǎng)基 不袋裝 2—4周
(棉塞) 袋裝 8—10周
試管培養(yǎng)基 不袋裝 8周
(軟木塞或蠟封) 袋裝 16—18周
有效期已過(guò)的培養(yǎng)基、緩沖液、稀釋液、淋洗液和試劑必須立即丟棄,不得再用于檢測(cè)中。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立簡(jiǎn)易的庫(kù)存控制系統(tǒng),有專人保管和建立臺(tái)賬,包括品名、規(guī)格、批號(hào)、數(shù)量、有效期、進(jìn)貨日期、使用日期和數(shù)量、以及領(lǐng)用人等信息,以隨時(shí)掌握有關(guān)信息。
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