喆圖小編給大家講講還原糖測定之高錳酸鉀滴定法:
樣品經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,其中還原糖在堿性環(huán)境下將銅鹽還原為氧化亞銅,加硫酸鐵后,氧化亞銅被氧化為銅鹽,以高錳酸鉀溶液滴定氧化作用后生成的亞鐵鹽,根據(jù)高錳酸鉀消耗量計(jì)算氧化亞同含量,再查表得還原糖量。
適用范圍 :高錳酸鉀滴定法適用于所有食品中還原糖的測定以及通過酸水解或酶水解轉(zhuǎn)化成還原糖的非還原性糖類物質(zhì)的測定。
實(shí)驗(yàn)所需儀器
滴定管 、25ml坩堝或G4坩堝 、隔膜真空泵 、電熱恒溫水浴鍋
所需試劑
除特殊說明外,實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水,試劑為分析純。
1 、量取50ml鹽酸加水稀釋至100 ml。
2 、稱取10mg甲基紅,用100ml乙醇溶解。
3 、稱取20g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至100ml。
4、稱取34.639g 硫酸銅,加適量水溶解,加0.5ml硫酸,再加水稀釋至500ml,用精制石棉過濾。
5、稱取173g酒石酸鉀鈉與50g氫氧化鈉,加適量水溶解,并稀釋至500ml,用精制石棉過濾,貯存于橡膠塞玻璃瓶中。
6、取石棉先用3mol/L鹽酸浸泡2~3天,用水洗凈,再加2.5mol/L氫氧化鈉溶液浸泡2~3天,傾去溶液,再用熱堿性酒石酸銅已液浸泡數(shù)小時(shí),用水洗凈。再以3 mol/L 鹽酸浸泡數(shù)小時(shí),以水洗至不呈酸性。然后加水振搖,使成微細(xì)的漿狀,用水浸泡并貯存于玻璃瓶中,即可用做填充坩堝用。
7 、0.1000mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液。
8 、稱取4g 氫氧吪鈉,加水溶解并稀釋至100ml。
9、 稱取50g硫酸鐵,加入200ml水溶解后,慢慢加入100ml硫酸,冷卻后加水稀釋至1L。
10、3mol/L鹽酸:量取30ml鹽酸,加水稀釋至120ml。
11、稱取約0.5~2 g固體樣品,置于250 ml容量瓶中,加50 ml水,搖勻。加入10 ml堿性酒石酸銅甲液及4 ml1mol/L氫氧吪鈉溶液,加水至刻度,混勻。靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,濾液備用
12、吸取100 ml樣品,置于蒸發(fā)皿中,用1 mol/L氫氧化鈉溶液中和至中性,在電熱恒溫水浴鍋上蒸發(fā)至原體積1/4后,移入250 ml容量瓶中。加50 ml水,混勻。
13、 稱取2~10 g樣品,置于250 ml容量瓶中,加200 ml水,在45℃電熱恒溫水浴鍋中加熱1 h。冷卻后加水至刻度,混勻,靜置。吸取200 ml上清液于另一250 ml容量瓶中。
14、稱取2~10 g樣品,先用乁醚或石油醚淋洗3次,去除醚層。加入50ml水混勻
15、吸取100 ml樣品置于蒸發(fā)皿中,在電熱恒溫水浴鍋上除去二氧化碳后,移入250 ml容量瓶中,并用水洗滌蒸發(fā)皿,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻后,備用。
16、吸取50ml處理后的樣品溶液,于400ml燒杯中,加入25ml堿性酒石酸銅甲液及25ml乙液,于燒杯上蓋一表面皿,加熱,控制在4min內(nèi)沸騰,再準(zhǔn)確煮沸2min,趁熱用鋪好石棉的坩堝或G4坩堝抽濾,并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀,至洗液不成堿性為止將坩堝放回原400ml燒杯中,加25 ml硫酸鐵溶液及25ml水,用玻棒攪拌使氧化亞銅*溶解,以0.1mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液滴定至微紅色為終點(diǎn)。
17、同時(shí)吸取50ml水,加與測樣品時(shí)相同量的堿性酒石酸銅甲、乙液,硫酸鐵溶液及水,按同一方法做試劑空白實(shí)驗(yàn)。
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